&使用方法

EthD-1 工作液的配制

1.制备储存液

用 DMSO 配制 2 mM 的 EthD-1。

注：EthD-1 储存液建议分装后于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 避光保存。

2.配制工作液

用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 0.1-10 μM 的 EthD-1 工作液。

注：请根据实际情况调整 EthD-1 工作液浓度，且现用现配。

3.细胞染色

【1】 细胞准备

悬浮细胞：离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。

贴壁细胞：弃去培养基，加入胰蛋白酶消化细胞。离心弃去上清后，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。

注：若不做流式实验，贴壁细胞可做爬片染色。

【2】 加入 1 mL EthD-1 工作液，室温孵育 15-60 分钟。

【3】400 g，4℃ 离心 3-4 分钟，弃去上清。

【4】加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。

【5】用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，在荧光显微镜或流式细胞仪下检测

试剂信息

英文名称：Ethidium Homodimer 1 (简写：EthD-1)

中文名称：溴乙啡锭二聚体1

CAS NO：61926-22-5

分子式：C46H50Cl4N8

分子量：856.75

状态：红色固体

Ex/Em：528/617nm

溶解性：溶于DMSO（2mM）、甲醇

纯度：≥95%

储存条件：-20℃避光干燥

&核酸结合机制

结合方式

EthD-1通过嵌入（intercalation） 方式插入双链DNA的碱基对之间，每个EthD-1分子覆盖4个碱基对，结合过程无序列特异性 。

结合对象：可结合dsDNA、ssDNA、RNA、寡核苷酸及三螺旋DNA 。

荧光增强：游离状态下荧光极弱，结合核酸后荧光强度提升>30倍

电荷依赖的细胞选择性

强正电荷特性：分子含多个氨基基团，携带高密度正电荷 。

膜通透性差异：

活细胞：完整细胞膜磷脂双层阻挡带正电荷分子进入 。

死细胞：膜结构崩解形成无序区域，允许EthD-1穿透并抵达细胞核 。

&相关试剂

Ethidium Bromide(EB)

EB Eraser 强力EB去除剂

Lucifer Yellow Cadaverine

Ethidium Homodimer 1(EthD-1)

CalceinRed,AM钙黄绿素红(红色)

Alexa Fluor 405-Streptavidin

Alexa Fluor 647-Streptavidin

168482-84-6，Calcein Blue AM

Ethidium Monoazide Bromide(EMA)

西安强化生物科技有限公司xxn对以上内容进行了系统整理！

本试剂用于科研领域，其他用途概不适用！